3 курс / Фармакология / ФАРМАКОЛОГИЯ_ПРЕПАРАТОВ_НА_ОСНОВЕ_ПРИРОДНЫХ_АЛЮМОСИЛИКАТОВ_И_ИХ

летальная для самок), контрольным крысам скармливали только основной рацион, на протяжении опыта крысы обеих групп находились в одинаковых условиях содержания и кормления.

На 21 день опыта (19-21 день беременности) половину беременных са-

мок каждой группы убивали декапитацией под наркозом диэтилового эфира с соблюдением принципов гуманности, изложенных в директивах Европей-

ского сообщества (86/609/ЕЕС) и Хельсинской декларации.

Крыс вскрывали и определяли степень общей и избирательной эмбрио-

токсичности: подсчитывали количество нормально и ненормально резвив-

шихся зародышей, живых и мертвых плодов, их массу, развитие, в яичниках подсчитывали количество желтых тел, число мест имплантаций, количество мест резорбций. Другую половину самок оставляли до родов и проводили наблюдение за физическим развитием потомства до окончания вскармлива-

ния (выживаемость, масса).

По полученным данным высчитывали процент предимплантационной

(в процентном отношении разность между количеством желтых тел и коли-

чеством мест имплантаций от числа желтых тел) и постимплантационной (в

процентном отношении разность между количеством мест имплантаций и количеством живых плодов от числа имплантаций) гибели эмбрионов.

Все плоды взвешивали, затем переносили в чашку Петри с физиологи-

ческим раствором и далее при помощи бинокулярной лупы и микроскопа проводили внешний осмотр плодов. При этом пытались выявить различные аномалии глаз (анофтальмию, микрофтальмию, циклопию), мозга (экзенце-

фалию, энцефалоцелию, гидроцефалию), лицевого черепа (заячью губу, вол-

чью пасть), конечностей, пальцев, позвоночника, хвоста, передней брюшной стенки. Далее все плоды разделили на две группы, одну группу плодов фик-

сировали в жидкости Буэна, у них изучали состояние внутренних органов,

другую группу плодов зафиксировали в 96%-ном спирте для изучения воз-

можных аномалий развития скелета.

141

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

После рождения крысят у оставшихся беременных крыс определяли ко-

личество плодов, из них число живых и мертвых, устанавливали среднюю массу потомства, наличие аномалий и уродств. Наблюдение за крысятами проводили в течение 30 дней, оценивая при этом степень их физического раз-

вития (время отлипания ушей, прорезывание глаз, развитие шерстного покро-

ва). По окончании лактации часть потомства убивали, проводили внешнее и внутреннее обследование на наличие аномалий внутренних органов и скелета.

В результате проведенных исследований установили, что назначение

тиононтрита-S в субтоксической дозе не вызывает нарушение процесса оплодотворения у опытных крыс, а скармливание препарата беременным бе-

лым крысам не оказывает патологического влияния на течение беременности и эмбриогенез, не изменяет продолжительность беременности. Число желтых тел в яичниках опытных крыс в среднем на одну самку составило 10,62±053,

а у контрольных – 11,42±0,41 (таблица 32). Среднее количество мест имплан-

тации в матке в опытной группе достигало 9,86±0,47 и в контрольной группе

10,54±0,69.

Постимплантационная гибель плодов у опытных крыс составила 7,7 %,

а в контроле 8,9 %. Видимых уродств в развитии плодов, как у опытных, так и у контрольных крысят не выявляли. При сравнении массы эмбрионов в опытной группе и контроле не было обнаружено значимых отличий.

По внешним признакам развитие опытных крысят в лактационный пе-

риод не отличалось от развития контрольного молодняка. Сроки развития,

как у опытных, так и контрольных крысят существенно не различались, от-

липание ушей происходило на 4-5 день, а на 16-17 день открывались глаза,

частичный волосяной покров появлялся у всех крысят на 5-6 день рождения,

а через 16-17 дней они полностью покрывались шерстью, на 18-20 день мог-

ли принимать прикорм. Средняя масса тела одного крысенка в опытной группе существенно не отличалась от массы тела контрольных животных.

Врожденных дефектов в развитии всех крысят не отмечено.

142

Таблица 32 – Результаты изучения влияния тиононтрита-S на

репродуктивную функцию белых крыс (n=12, M±m)

	N п/п	Показатели	Опыт	Контроль
		Внутриутробный период
	1	Число желтых тел в яичнике	10,62±0,53	11,42±0,41
	2	Число мест имплантации в матке	9,86±0,47*	10,54±0,69
	3	Процент предимплантационной смерт-	7,2%	7,7%
		ности
	4	Число резорбций	0,46	0,48
	5	Кол-во живых плодов всего в одном	9,1±0,58*	9,6±0,61
		помете
	6	Число погибших плодов (на 1 самку)	0,36	0,44
	7	Процент постимплантационной смерт-	7,7%	8,9%
		ности
	8	Масса эмбрионов	4,92±0,18**	4,88±0,20
	9	Аномалии развития внутренних орга-	отсутствуют	отсутствуют
		нов и скелета
		Лактационный период
	10	Число живых крысят (на одну самку) к	8,5±0,44	9,0±0,47
		концу лактации
	11	Средняя масса 1 крысенка (г)	5,08±0,09**	4,96±0,12
	12	Уродства и аномалии скелета и внут-	отсутствуют	отсутствуют
		ренних органов
Примечание: * - степень достоверности Р ≤ 0,05, ** - Р ≤ 0,01, *** - Р ≤ 0,001

Таким образом, скармливание тиононтрита-S в субтоксической дозе крысам не оказывает отрицательного влияния оплодотворяющую способность самок, на эмбриональное развитие и постнатальный период жизни плодов.

Изучение эмбриотоксического и тератогенного действия нонтронита

были проведены на 12 половозрелых беспородных белых самках, которым ежедневно внутрижелудочно задавали нонтронит дозе 0,71 г/кг массы тела.

Контрольные животные никаких препаратов не получали.

В результате проведенного эксперимента установлено, что назначение нонтронита в субтоксической дозе беременным белым крысам не оказывало негативного влияния на течение беременности и ее продолжительность, а так-

же на плодовитость. Число желтых тел в яичниках опытных крыс в среднем на

143

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

одну самку составило 13,4±0,68, а у контрольных – 13,0±0,89. Среднее количе-

ство имплантационных эмбрионов в опытной группе достигало 12,8±0,66 и в контрольной группе 12,4±0,6. Постимплантационная гибель плодов у живот-

ных опытной группы достигала 4,5 %, а в контроле 4,6 %. Аномалий в разви-

тии плодов, как у опытных, так и у контрольных животных не отмечали.

Внешние признаки развития как опытных, так и контрольных крысят не раз-

личались и проходили примерно в одинаковое время, уродств и аномалий в развитии крысят не отмечено.

Во второй серии опытов влияние нонтронита на течение беременности изучали на глубокосупоросных свиноматках. С этой целью по принципу пар аналогов было сформировано 3 группы свиноматок крупно-белой породы по

3 матки в каждой, за 8-10 дней до опороса. В 1-ой группе за 8 дней до опоро-

са и 8 дней после назначали нонтронит в дозе 0,71 г/кг массы тела. Во 2-ой группе в аналогичные дни скармливали смесь макро- и микроэлементов в ре-

комендуемых дозах. Животным 3-ей группы (контрольной) лекарственные средства не назначали. На протяжении всего эксперимента следили за клини-

ческим состоянием свиноматок и народившегося молодняка, у которого учи-

тывали уродства и аномалии.

В контрольной группе от трех свиноматок было получен 31 поросенок со средней массой тела 1,25 кг, от 2-ой группы – 30 поросят со средней мас-

сой тела 1,1 кг, от маток 3-ей группы – 31 поросенок со средней массой тела

0,98 кг. Отклонений от нормы развития, наличия уродств и аномалий у поро-

сят во всех группах не отмечали. В опытных группах наблюдали более ин-

тенсивный рост поросят.

У всех свиноматок на протяжении всего периода наблюдений не регистри-

ровали существенных отклонений от нормы в поведении, общем состоянии и ап-

петите, реакции на внешние раздражители и рефлексы были сохранены. Явлений интоксикации у животных, получавших нонтронит, не наблюдали.

144

Таким образом, длительное применение нонтронита беременным жи-

вотным не оказывает повреждающего действия на эмбриональное развитие и не вызывает тератогенного эффекта.

В ходе проведения эксперимента по изучению эмбриотоксического и те-

ратогенного действия имунокора установили, что скармливание препарата в субтоксической дозе не вызывало уменьшения количества желтых тел в яични-

ках, не оказывало отрицательного влияния на оплодотворение и плодовитость,

на ростовые процессы плодов и не приводило к дисморфогенезу плодов.

В яичниках желтые тела располагались равномерно, были покрыты со-

единительной капсулой, имели округлую или овальную форму.

Значения до- и постимплантационной гибели в группе животных, полу-

чавших исследуемый препарат в дозе 0,71 г/кг массы тела, не показали значи-

мых отличий от контрольной группы. Средняя масса одного эмбриона у крыс,

получивших препарат, составила 5,73 г, а у контрольных – 5,88 г, уродств и аномалий развития у крысят не отмечено. При изучении внутренних органов и скелета эмбрионов и крысят патологических изменений не выявляли.

Таким образом, назначение имунокора самкам крыс не влияет отрица-

тельно на репродуктивную функцию и не оказывает тератогенного и эмбрио-

токсического действия.

3.2.7 Патморфология внутренних органов при применении препаратов

Изучение влияния на макро- и микроструктуры внутренних органов для изучения патогенеза интоксикации после применения исследуемых пре-

паратов были проведены на белых крысах, цыплятах-бройлерах и поросятах,

у которых изучали параметры хронической токсичности. Животные и птица были убиты быстрой декапитацией (перерезанием спинного мозга) и под-

вергнуты патологоанатомическому вскрытию.

Для гистологического исследования отбирали внутренних органов (ку-

сочки сердца, легких, печени, почек, селезенки, желудка, кишечника) и фик-

145

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

сировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина. После фиксации их заливали в парафин, готовили срезы толщиной 4-6 мкм, окрашивали ге-

матоксилин-эозином и микроскопировали. Исследования проводили под микроскопом МС 300 (Австрия), увеличение х5, х10. При проведении гисто-

логических исследований учитывали наличие структурных изменений и жи-

ровой инфильтрации в паренхиме внутренних органов, считающихся харак-

терными признаками токсикоза.

Патоморфология органов при применении имунокора. Изучение влия-

ния на макро- и микроструктуры внутренних органов проведены на белых крысах, у которых изучали хроническую токсичность в максимальной дози-

ровке. Наружный осмотр убитых животных и вскрытие их не выявили види-

мых изменений покровных тканей и внутренних органов. Упитанность вы-

ражена, волосяной покров блестящий, без очагов аллопеции. Расположение внутренних органов, как у опытных, так и контрольных крыс было анатоми-

чески правильным. В плевральной и брюшной полости жидкости не обнару-

жены, серозные оболочки полостей имели ярко-розовый цвет, гладкую и бле-

стящую поверхность (рисунок 8).

Рисунок 8 – Внутренние органы при вскрытии опытной крысы.

146

Просветы трахеи и бронхов были свободны, плевра имела гладкую по-

верхность. Легкие не увеличены, симметрично расположены, ткань розового цвета. Печень с заостренными краями, плотной консистенции, темно-

вишневого цвета, капсула органа гладкая, блестящая. Сердце не увеличено,

поверхность перикарда и эпикарда блестящая, гладкая. Миокард ярко-

красного цвета, представлен правильно ориентированными пучками волокон с сохраненной поперечной исчерченностью (рисунок 9).

Рисунок 9 – Печень, легкое и сердце опытной крысы

При гистологическом исследовании у контрольных крыс выявляли ишемию сердца и геморрагический инфаркт (рисунок 10, 11).

Рисунок 10 – Ткань сердца крысы (контроль), ишемия сердца (окраска гематоксилин-эозином, ув. 10)

147

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Рисунок 11 – Ткань сердца крысы (контроль), геморрагический инфаркт

(окраска гематоксилин-эозином, ув. 10)

Печень не увеличена, с гладкой капсулой и заостренными краями. На разрезе темно-вишневого цвета, балочный рисунок хорошо выражен. Цен-

тральные вены и внутридольковые капилляры умеренно кровенаполнены

(рисунок 12).

Рисунок 12 – Ткань печени крысы (опыт), (окраска гематоксилин-эозином, ув. 10)

148

У двух контрольных крыс наблюдали жировое перерождение печени, в

отдельных гепатоцитах белковую зернистую дистрофию (рисунок 13). Гепа-

тоциты, находящиеся в состоянии жировой дистрофии, были набухшие, имели округлую форму, ядра сморщены, расположены в центральной части клеток.

Рисунок 13 – Ткань печени крысы (контроль), жировое перерождение, (окраска гематоксилин-эозином, ув. 10)

Почки не увеличены, темно-вишневого цвета, расположены симмет-

рично. Капсула почки снималась легко, корковое и мозговое вещество на разрезе хорошо различимы, слизистая лоханок гладкая, светло-розового цве-

та. У двух контрольных крысы определяли пролиферацию в почках и очаги некроза (рисунок 14, 15).

Селезенка в размере не увеличена, с гладкой капсулой. На разрезе гра-

ницы фолликулов четкие, центры пролиферации выражены хорошо.

Слизистая оболочка желудка и кишечника серо-розового цвета, без изъязвлений и кровоизлияний, хорошо развита. Дистрофических и воспали-

тельных явлений не обнаружено.

149

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Рисунок 14 – Ткань почек крысы (контроль), пролиферация (окраска ге-

матоксилин-эозином, ув. 10)

Рисунок 15 – Ткань почек крысы (контроль), некротический очаг в строме почек (окраска гематоксилин-эозином, ув. 10)

Таким образом, длительное назначение имунокора в 1/10 от макси-

мально токсической дозы, не оказывает токсического действия на внутрен-

ние органы и ткани животных и не изменяет их структуру.

Выявленные патоморфологические и гистологические изменения во внутренних органах контрольных крыс, возможно, обусловлены погрешно-

150